爱绿宁对鳊鱼生长和抗运输应激、暴露与攻毒应激的影响

在水产养殖过程中，因药物使用、疾病因素、溶氧、pH值、氨、亚硝酸盐、硫化氢等水质因子以及养殖密度（如高密度称为拥挤胁迫）、饲料的选择与投喂、运输暴露等都会对水产养殖动物造成应激反应。
应激发生后，轻则导致鱼厌食或饵料系数偏高，高则导致鱼发病死亡，因而控制或减少鱼类应激，对于获得高产、稳产至关重要。

本试验旨在验证爱绿宁（水产动物专用型）对鳊鱼生长与抗应激能力的影响。

1  材料与方法

1.1  试验鱼及试验设计

试验用鳊鱼（Megalobrama amblycephala）为当年人工繁殖的同一批苗种，购自重庆市荣昌县梅石坝渔场，试验在西南大学水产系室内循环养殖系统中进行。试验前暂养一周，每天早、中、晚饲喂对照
组饲料3次至饱食。试验采用的养殖设施为长方形玻璃缸(总体积0.4m3、水体体积0.2 m3)。养殖试验期间均连续充氧（除投饵期间外）。

试验开始前停饲 24 h。选择体重相近(5.2±0.4)g、体格健壮的幼鱼1200尾，随机分成4组，每组三个缸、每缸100尾，具体分组见表1。每天早、中、晚投喂3次，至饱食，投喂结束后 30 min，吸出池内残
饵及粪便。养殖试验共进行42d，试验期间水温25.0±1.0℃，pH7.5±0.5，溶氧≥5mg/L，氨氮<0.2mg/L，余氯<0.1mg/L。

1.2  试验饲料

饲料由西南大学水产系水产动物繁育和健康养殖研究中心制作。配制饲料前，饲料原料均经粉碎机粉碎并全部过60目筛，按配方要求均匀混合成粉料，在30℃鼓风干燥箱内干燥24 h，置冰箱0℃保存。爱绿
宁（水产专用型）产品由北京爱绿生物科技有限公司提供。具体配方组成和营养成分分析见表2。

1.3  生长性能相关指标

1.3.1 生长速度

以鱼质量的鲜重变化、增重率和特定生长率等表示生长速度。增重率( ％ ) ＝ [( Wt-W0) ／W0]×100％；特定生长率( ％/d )＝[(LnW t-LnWo) /d]×100%，W0和Wt分别表示养殖开始和结束时的鱼体质量
（g）。

1.3.2  饲料利用效率

以饲料系数和蛋白效率表示，饲料系数=饲料投喂量 / 鱼体增重量；蛋白效率=( Wt-W0) ／F×P％，F指饲料消耗量，P%指饲料蛋白质含量。

1.4  抗应激机能测定

1.4.1 运输应激

试验设计  鳊鱼养殖试验结束后停止喂食24 h。AL1、AL2和AL3组的各重复缸中分别取出5尾鱼放入鱼苗运输袋中充入纯氧并打包；对照组则各重复缸中分别取出10尾，每个运输袋中放入5尾鳊鱼充入纯氧
并打包（具体见表3），用皮卡车运输2 h。运输后立即将鱼快速深度麻醉后采集血样。运输过程中皮卡车平均速度为50～60 km／h。

1.4.2 暴露应激

鱼的取样方法与运输应激相同，取样后置于空气中同等养殖温度下暴露3min。

取血、样品处理及测定与运输应激相同。

1.4.3  嗜水气单胞菌攻毒试验

嗜水气单胞菌（BYK-038）毒株来源于上海海洋大学农业部渔业动植物病原库，病原菌按病原库推荐培养方法在28°C条件下培养24h后，无菌生理盐水洗涤后，置离心机中1000 g条件下离心10min。去
上清液，用无菌生理盐水调整细菌浓度至5×107 cfu。按0.10mL/尾的剂量注射到鳊鱼腹腔，每个试验组30尾鱼，10尾/重复，其后连续7天记录其死亡率。

1.5 试验数据的统计分析

采用SPSS17.0 统计软件对数据进行统计学分析，先对数据作单因素方差分析(ANOVA)，处理间若有显著差异，再作Duncan's多重比较，P<0.05表示差异显著。

2  试验结果

2.1 对生产性能的影响

爱绿宁以100～200g/t剂量添加后，鳊鱼的生长性能指标如表4所示。从表中可以看出：1）爱绿宁显著提高了鳊鱼的增重率和特定生长率（P<0.05），提高幅度分别为21.8%～30.9%、11.7%～15.9%，
但各AL组之间无显著差异（P>0.05）；2）蛋白效率也因爱绿宁的补充而显著提高了25.8%～34.0%，并随着爱绿宁补充量的增加而呈现逐渐提高的趋势，AL3组较对照组和AL1组均有显著提高（P<0.05）；
3）而饲料系数则与蛋白效率呈现出完全相反的变化规律，有效降低20.6%～25.3%；4）爱绿宁的补充对鳊鱼成活率较对照组均有显著提高（P<0.05）。

2.2 运输应激对鳊鱼的影响

2.2.1 鳊鱼运输后血清皮质醇激素含量的变化

第21d：经过2h的运输后，除阳性对照组有1尾死亡外，阴性对照、AL1、AL2和AL3组均未出现死亡。在运输的过程中，阳性对照组鱼在氧气袋中，水波的动荡下表现出烦躁不安，激烈游动，用头不断冲撞
袋壁，试图逃离这种环境。而AL1、AL2和AL3组鳊鱼在运输初期也表现出窜出水面等较激烈反应，持续约15~20min即恢复平静，静卧袋底或轻轻游动。运输结束后，皮质醇激素含量检测结果表明，阳性对照组、
AL1、AL2和AL3组的鱼血清皮质醇激素含量较阴性对照组均显著提高（P<0.05），但AL1、AL2和AL3组的血清皮质醇激素含量比阳性对照组显著降低（P<0.05）（见表5）。

第42d：其趋势与第21d相同。

2.2.2 鳊鱼运输后血清蛋白和酶活性的变化

第21d：对2h运输应激后鳊鱼血清总蛋白（TP）和白蛋白（AP）测定表明，AL1、AL2、AL3和阳性对照组鱼血清TP和AP均较阴性对照组显著提高（P<0.05），但AL1、AL2和AL3的TP和AP较阳性对照组显
著降低（P<0.05）。

阳性对照组的鳊鱼血清谷丙转氨酶（GPT）和碱性磷酸酶（ALT)较阴性对照组显著提高（P<0.05），但AL2和AL3的血清GPT和ALT与阴性对照组相比无显著差异（P>0.05）。

第42d：各组间TP、AP、GPT和ALT变化趋势与第21d基本一致。

2.2.3 鳊鱼运输后血清中其它几种物质含量的比较

第21d：从表5中可以看出，除AL3外，运输组的鱼血糖（GLU）与阴性对照相比有显著增加（P<0.05），但均显著低于阳性对照组（P<0.05）。

阳性对照组的血清甘油三酯（TG）和血清总胆固醇（TC）较阴性对照组显著提高（P<0.05），爱绿宁补充组的血清TG和TC则与阴性对照组无显著差异（P>0.05）。

第42d：GLU在各组间的变化趋势与第21d同；爱绿宁补充组的血清TG和TC与阴性对照组无显著差异（P>0.05）。

2.3  鳊鱼暴露后血清中其它几种物质含量的比较

第42d：从表6中可以看出，鳊鱼暴露应激血清学变化呈现出与运输应激几乎一致的变化规律，表明饲料中添加爱绿宁对鳊鱼具有很好的抗暴露应激作用。 

2.4  细菌攻毒后成活率

    未经嗜水气单胞菌攻毒的阴性对照组在观察的7天内未出现死亡。其余各组从第2d开始出现死亡，除阳性对照和AL2组外，各组至第5d后停止死亡。AL1、AL2和AL3组的鳊鱼成活率分别为73%，66%和70%，
均显著高于阳性对照组鳊鱼成活率（50%）。

3  小结

3.1  爱绿宁对鳊鱼生产性能的影响

爱绿宁的补充显著提高了鳊鱼的增重率和特定生长率，但100、150和200g/t的补充量之间没有显著差异；爱绿宁的补充能显著提高鳊鱼对饲料蛋白的利用效率，且随补充量的增加而提高，饲料系数则与蛋
白效率相反，呈逐步降低趋势；爱绿宁补充组的鳊鱼成活率较对照组显著提高。

3.2  爱绿宁对鳊鱼运输应激的缓解作用

3周和6周养殖后均进行了运输应激，阳性对照组的鳊鱼血清皮质醇、白蛋白、血清总蛋白和血糖含量等指标均显著高于阴性对照组，各爱绿宁添加组的鳊鱼血清相应指标也基本均显著高于阴性对照组，但
与较阳性对照组比较则显著降低。阳性对照组的鳊鱼经过运输应激后，多项生化指标如谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、甘油三酯和胆固醇等均呈较大幅度上升，而爱绿宁补充组则上升幅度减小，甚至与阴性对照组
无显著差异。表明饲料中补充爱绿宁后，在运输应激中具有很好的抗应激效果。

3.3  爱绿宁对鳊鱼暴露应激的缓解作用

3周和6周养殖试验之后的3min暴露应激发现，爱绿宁补充组的鳊鱼血清皮质醇激素、白蛋白、血清总蛋白和血糖含量等指标比阴性对照组均显著提高，但较阳性对照组有显著降低（P<0.05）。阳性对照
组的鳊鱼经过暴露应激后，多项生化指标如谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、甘油三酯和胆固醇等均呈较大幅度上升，而爱绿宁补充组则上升幅度减小，甚至与阴性对照组无显著差异。表明补充爱绿宁对抗暴露应激
效果良好。

3.4  爱绿宁对鳊鱼抗病能力的影响

经嗜水气单胞菌攻毒后，各组鳊鱼均出现了死亡，成活率较阴性对照组均显著降低。但与此同时，爱绿宁补充组的鳊鱼攻毒后成活率相比阳性对照组显著提高，表明爱绿宁能显著提高鳊鱼的抗病能力。

（西南大学水产动物繁育和健康养殖研究中心 唐冬梅 黄玉萍 郑宗林）